血凝试验是检查什么的(血凝试验)
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1、 1%红细胞的准备:为了避免部分鸡的红细胞自凝,最好取3只SPF鸡或未免疫的成年公鸡的血液。(抗凝剂与血液的比例为1,333,604)
2、 2.采血后,将血液加入10ml离心管中,加入3-4倍体积的生理盐水,以2000-3000 r/min离心5-10 min,离心3-5次。
3、 3.弃去上清液和红细胞上层的白细胞膜,再加入十倍血容量以上的PBS溶液,慢慢倒置(避免用力过猛使红细胞破碎),使其充分混合,然后离心弃去上清液,重复数次,直至上清液澄清透明。
4、 取96孔微量血凝反应板,用微量移液器吸取pbs25ul,从第1孔至第12孔加入,每孔25ul。
5、 将25ul新城疫标准抗原吸入第一个孔中,吹3-5次。充分混合后,从第一个孔中吸出25ul,然后在第二个孔中吹3-5次。充分混合后,从第二个孔吸出25ul,然后加入第三个孔,以此类推,稀释至第十一个孔。
6、 25ulpbs从第12个孔吸到第1个孔并悬浮。
7、 吸取25ul1%的1%鸡红细胞悬液,从第十二孔倒至第一孔,悬浮。
8、 之后,放在微量移液器上,摇匀。在室温(20-25)下静置40分钟。得到读数结果。
9、 取96孔微量血凝反应板,用微量移液器吸取pbs 25ul,从第一孔至第十一孔加入,第十二孔加入50ul。然后吸取25ul待测血清,加入第一个孔,吹3-5次。混合后从第一个孔吸出来加到第二个孔,吹3-5次,以此类推。
10、 吸取25ul四个单位的病毒,从第十一孔加入到第一孔,(悬浮),然后轻敲反应板,室温静置30分钟。最后加入红细胞,倒过来加入。轻轻摇动反应板,在室温下静置40分钟,然后读取。实验人员应做好记录,清洁桌子,并对医疗废物进行单独消毒处理。
本文到此结束,希望对大家有所帮助。
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